通過上周對流式細胞儀原理的了解，童靴們可以更好的掌握實驗，今天接著干貨分享如何快速對流式細胞儀數(shù)據(jù)采集與分析，以便更準確的得出結論。

一、數(shù)據(jù)采集及顯示

       將前向散射光檢測器、側向散射光檢測器及熒光檢測器收集的光信號轉換成電壓脈沖后，再通過模數(shù)轉換器轉換成為計算機能夠儲存處理的數(shù)字信號。流式細胞儀的數(shù)據(jù)以FSC標準格式存儲，該標準由“分析細胞學協(xié)會”制定。根據(jù)FSC標準，數(shù)據(jù)存儲格式應包括三個文件：樣本獲取文件，數(shù)據(jù)設置文件和數(shù)據(jù)分析結果。

       數(shù)據(jù)采集存儲完畢后，細胞亞群可以幾種不同格式顯示。單參數(shù)如FSC或FITC（FL1）可使用直方圖，橫軸表示熒光通道，縱軸表示在該通道內收集到的細胞數(shù)量（如圖1）。處在同一通道的每一細胞符合該通道的信號值，而且具有相同的信號密度。通道右側信號的熒光強度明顯高于左側，越靠右側熒光亮度越強。雙參數(shù)可在二維散點圖中同時顯示，X軸顯示通道1（FL1），Y軸顯示通道2（FL2）。三維圖通過X，Y，Z三個軸分別顯示每個通道的細胞量。

二、設門

       通過設門的方法可以定義細胞亞群的區(qū)域。如，血樣本是混合細胞群，如果想單獨分析淋巴球細胞，可根據(jù)FSC或細胞大小，在FSC，SSC的散點圖中設門，其數(shù)據(jù)結果只反映淋巴細胞亞群的熒光特性。

三、細胞亞群的數(shù)據(jù)分析

       門內細胞亞群的數(shù)據(jù)結果可在隨后的圖中顯示。我們可以通過單參數(shù)直方圖，二維點圖和三維圖來分析結果。單參數(shù)直方圖可定位邊界，二維點圖可設置象限標志。如果需要，還可以建立數(shù)據(jù)統(tǒng)計表以輸出結果。

       直方圖可直觀的顯示單個參數(shù)的細胞數(shù)量。陰性對照用于決定直方圖中單參數(shù)的左右邊界。